ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده ژن gra4 توکسوپلاسما گوندی همراه با ادجوانتil12 در موش balb/c

چکیده توکسوپلاسما گوندی انگل تک یاخته درون سلولی است و مشکلات عمده ای در زمینه پزشکی ودامپزشکی ایجاد می کند ، بنابراین ضرورت یافتن واکسنی که بتواند پاسخ ایمنی را در برابر این انگل ایجاد کند را مطرح می سازد . این تحقیق با هدف ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده حاوی ژن gra4 به تنهایی وهمراه با ادجوانت il12 در موش/c balb صورت گرفته است . دراین تحقیق از ژن gra4 توکسوپلاسما گوندی که در وکتور بیانی pcdna3 کلون شده استفاده گردید. ترانسفکت این پلاسمید در سلول یوکاریوت (cho) انجام شد وبیان ژن توسط sds-page و western blot تاییدگردید . پس از استخراج انبوه پلاسمید، با تزریق عضلانی پلاسمید نوترکیبgra4 به تنهایی وهمراه باpcil12 سه بار به فاصله سه هفته، ایمونیزاسیون موش ها انجام شد. نتایج سنجش سایتوکاین های inf-? و il-4 نشان داد کـه میزان پرولیفراسیون لنفوسیت هـا و سطح سایتوکاین inf-? در پلاسمید نوترکیبpcgra4 و pcgra4+pcil12 در مقایسه با گروه هـای کنترل بالاتـر بود.حـال آن که مقدار il-4 افزایش قابل توجهی نداشته است.تکثیر سلول های طحال با استفاده از روش mtt موید القای پاسخ سلولی بود. بعد از چالش موش ها با سویه کشنده rh انگل، میزان بقای موشهای گروه مورد به گروه های کنترل بیشتربود، همچنین اندازه گیری آنتی بادی توتال igg اختلاف معنی دار را بین گروههای مورد وکنترل را تائید کرد(05/0? p) .اندازه گیری ایزوتایپهای igg2aوigg1 نشان دادگروه پلاسمید نوترکیب pc-gra4 وpcgra4+pcil12 در مقایسه با گروههای کنترل باعث تحریک igg2a می-شود(05/0? p) اما در مورد igg1 بین گروه های مورد و کنترل اختلاف معنی دار وجود نداشت(05/0? p) . تزریق پلاسمید نوترکیب pcgra5 همراه با il12 باعث تولید مقادیر بیشتری ifn-?شده و این امر با ترشح igg2a تأیید و پاسخ ایمنی به سمتth1 تمایل می کند . این مطالعه نشان میدهد استفاده از پلاسمید حاوی ژن gra4 به همراه ادجوانت il12 سبب القا پاسخ سلولی و هومورال در مقابل انگل توکسوپلاسما گوندی می شود. واژگان کلیدی : توکسوپلاسما گوندی، gra4 ژن ،dna واکسن ، ادجوانت il12 .